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Tipo do documento: Tese
Título: Diversidade genética baseada em caracteres morfoagronômicos e moleculares visando a identificação de genótipos de vinca (Catharanthus roseus [L.] G. Don) com potencial para a produção de biomassa foliar e de alcaloides
Título(s) alternativo(s): Genetic diversity based on morphoagronomic and molecular characters aiming to identify periwinkle (Catharanthus roseus [L.] G. Don) genotypes with potential for the production of leaf biomass and alkaloids
Autor(es): Amorim, Gustavo Torres dos Santos
Orientador(a): Damasceno Junior, Pedro Corrêa
Primeiro coorientador: Costa, José Luiz Mazzei da
Primeiro membro da banca: Damasceno Junior, Pedro Corrêa
Segundo membro da banca: Costa, José Luiz Mazzei da
Terceiro membro da banca: Menezes, Bruna Rafaela da Silva
Quarto membro da banca: Santos, Marilene Hilma dos
Quinto membro da banca: Pinto, Tatiana de Oliveira
Palavras-chave: melhoramento de plantas;plantas medicinais;estatística multivariada;descritores totais;marcador molecular ISSR;HPLC-DAD;vimblastina;descritores mínimos;plant breeding;medicinal plants;multivariate statistics;total descriptors;ISSR molecular marker;HPLC-DAD;vinblastine;minimum descriptors
Área(s) do CNPq: Agronomia
Idioma: por
Data do documento: 30-jul-2024
Editor: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
Sigla da instituição: UFRRJ
Departamento: Instituto de Agronomia
Programa: Programa de Pós-Graduação em Fitotecnia
Citação: AMORIM, Gustavo Torres dos Santos. Diversidade genética baseada em caracteres morfoagronômicos e moleculares visando a identificação de genótipos de vinca (Catharanthus roseus [L.] G. Don) com potencial para a produção de biomassa foliar e de alcaloides. 2024. 127 f. Tese (Doutorado em Fitotecnia) - Instituto de Agronomia, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, 2024.
Resumo: A vinca (Catharanthus roseus [L.] G. Don) distingue-se por ser fonte dos alcaloides vincristina e vimblastina utilizados em quimioterápicos para o tratamento convencional de tumores, leucemias e linfomas. No entanto, estas substâncias ocorrem em baixas concentrações nas folhas da espécie. Nesse sentido, é fundamental desenvolver um programa de melhoramento genético. Diante do exposto, objetivou-se conhecer e estimar a diversidade genética entre 79 genótipos de C. roseus com base em variáveis morfoagronômicas. Além disso, avaliou-se a produção de biomassa de folhas secas (BFOs) em 79 genótipos de vinca e, em seguida, foram selecionadas as melhores plantas para esta variável. Em tais plantas, a presente pesquisa buscou conhecer o potencial da produção dos alcaloides catarantina (CAT), vindolina (VDL), vincristina (VCR) e vimblastina (VBL), bem como estimar a diversidade molecular verificada via marcadores de DNA do tipo ISSR (Inter Simple Sequence Repeats). Por fim, pretendeu-se propor uma lista de descritores mínimos para a cultura da vinca. No primeiro capítulo, a diversidade genética foi acessada através de descritores morfoagronômicos. Para isso, utilizou- se diferentes estratégias de análise multivariada, como a análise de agrupamento UPGMA, Anosim, índices de diversidade de Shannon (H’) e de Pielou (J’) e importância relativa das variáveis. No segundo capítulo, apenas os melhores genótipos para a produção de BFOs e positivos para a presença de alcaloides prosseguiram para as análises químicas. Os teores dos alcaloides CAT, VDL, VCR e VBL foram determinados em HPLC-DAD (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a Detecção de Arranjo de Fotodiodos). Posteriormente, estimou-se a produção dos alcaloides por planta (BFOs x teor dos alcaloides). Os genótipos também tiveram seu DNA extraído e analisado via 15 primers ISSR. Estimou-se a diversidade molecular utilizando a análise de agrupamento UPGMA e via índices de H’ e de J’. No terceiro capítulo, foram elencados 15 descritores mínimos, nove foram de natureza qualitativa e seis de natureza quantitativa. Os descritores de natureza quantitativa foram transformados para descritores multicategóricos. Após a união da matriz de descritores de origem qualitativa e os de origem quantitativa, os dados foram submetidos a análise de agrupamento. Os resultados demonstraram que a diversidade genética da coleção acessada através de 18 descritores morfoagronômicos foi baixa a moderada. Dos 79 genótipos avaliados, 15 deles apresentaram a BFOs estatisticamente superior à média da população. Dentre os 15 genótipos superiores para BFOs, o UFRRJ VIN007/14(PAB) foi descartado, pois foi negativo para a presença de alcaloides. Na HPLC-DAD foi possível identificar a VBL em 13 das 14 plantas analisadas. Já CAT e VDL estiveram presentes em todas e a VCR não foi detectada em nenhuma delas. Três genótipos se destacaram para a produção de VBL. O genótipo UFRRJ VIN013/22(PAB) alcançou o maior teor de VBL (0,77 mg/g de BFOs) e a maior produção de VBL/planta (13,61 mg). Por outro lado, não foram observados genótipos promissores para os teores de CAT e VDL. A diversidade molecular foi alta entre os genótipos elencados como superiores para produção de BFOs, haja vista as distâncias genéticas obtidas no dendrograma, corroboradas pelos elevados índices de H’ (5,66) e de J’ (0,96). Os 15 descritores mínimos propostos possibilitaram a distinção no dendrograma de todos os 77 genótipos analisados. Isto ocorreu até mesmo em genótipos próximos geneticamente.
Abstract: Periwinkle (Catharanthus roseus [L.] G. Don) is distinguished for being the source of the alkaloids vincristine and vinblastine used in chemotherapy for the conventional treatment of tumors, leukemias, and lymphomas. However, these substances occur in low concentrations in the leaves of this species. In this sense, it is essential to develop a genetic improvement program. In view of the above, the objective was to identify and estimate the genetic diversity among 79 genotypes of C. roseus based on morphoagronomic variables. In addition, the production of dry leaf biomass (BFOs) in 79 periwinkle genotypes was evaluated, and then the best plants for this variable were selected. In such plants, the present research sought to understand the potential for the production of the alkaloids catharanthine (CAT), vindoline (VDL), vincristine (VCR) and vinblastine (VBL), as well as to estimate the molecular diversity verified via DNA markers of the ISSR (Inter Simple Sequence Repeats) type. Finally, we intended to propose a list of minimum descriptors for the periwinkle crop. In the first chapter, genetic diversity was accessed through morphoagronomic descriptors. For this, different multivariate analysis strategies were used, such as UPGMA cluster analysis, Anosim, Shannon (H’) and Pielou (J’) diversity indices and relative importance of variables. In the second chapter, only the best genotypes for BFOs production and positive for the presence of alkaloids proceeded to chemical analyses. The levels of the alkaloids CAT, VDL, VCR and VBL were determined by HPLC-DAD (High- Performance Liquid Chromatography-Diode Array Detection). Subsequently, the alkaloid production per plant was estimated (BFOs x alkaloid content). The genotypes also had their DNA extracted and analyzed using 15 ISSR primers. Molecular diversity was estimated using UPGMA cluster analysis and H’ and J’ indices. In the third chapter, 15 minimum descriptors were listed, nine of which were qualitative and six of which were quantitative. The quantitative descriptors were transformed into multicategorical descriptors. After combining the matrix of qualitative and quantitative descriptors, the data were subjected to cluster analysis. The results showed that the genetic diversity of the collection accessed through 18 morphoagronomic descriptors was low to moderate. Of the 79 genotypes evaluated, 15 of them presented BFOs statistically higher than the population average. Among the 15 superior genotypes for BFOs, UFRRJ VIN007/14(PAB) was discarded, as it was negative for the presence of alkaloids. In HPLC-DAD, it was possible to identify VBL in 13 of the 14 plants analyzed. CAT and VDL were present in all of them, and VCR was not detected in any of them. Three genotypes stood out for VBL production. The genotype UFRRJ VIN013/22(PAB) achieved the highest VBL content (0.77 mg/g of BFOs) and the highest VBL production/plant (13.61 mg). On the other hand, no promising genotypes were observed for CAT and VDL levels. Molecular diversity was high among the genotypes listed as superior for BFOs production, given the genetic distances obtained in the dendrogram, corroborated by the high H’ (5.66) and J’ (0.96) indices. The 15 minimum descriptors proposed allowed the distinction in the dendrogram of all 77 genotypes analyzed. This occurred even in genetically close genotypes.
URI: http://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/26137
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